コンベンショナルノックアウトマウス作製受託

遺伝子改変マウス作製についてお打合わせ

まずお客様がご希望される遺伝子をデータベースで調べます。予想されるタンパク質の機能を完全に破壊するために、最適のエキソンを選びます。またお客様でエキソンにご指定がある場合や複数のエキソンの欠失にも対応可能です。周辺領域のクローニングも当社から提案します。

遺伝子改変用ベクターの構築

より具体的な案を提示して、ベクター構築に取り掛かります。通常、標的遺伝子の周辺領域はPCRにて増幅しクローニングします。

遺伝子導入から組み換えES細胞を樹立

構築した遺伝子改変用ベクターをエレクトロポレーションによりES細胞に導入します。PCRによる1次スクリーニング、詳細解析、Neoプローブによるサザンブロット解析により、相同組換えES細胞を樹立します。

樹立した組み換えES細胞からマウス作製

樹立した組み換えES細胞よりマウスを作製します。計画通り遺伝子改変用ベクターが挿入されたES細胞（最大3クローン）からキメラマウスを作製します。

形質転換したES細胞が生殖系列へ移行しているかを確認後、ヘテロマウス作製へと進みます。